資訊中心
NEWS CENTER
資訊中心
前言
毛細管電泳技術(shù)可應(yīng)用于離子、化合物、蛋白、核酸、糖類以及細胞 和病毒等物質(zhì)的分離和分析,具有高效、快速、成本低、應(yīng)用模式開放等顯著優(yōu)勢。先多用于環(huán)境、食品和工業(yè)中的離子分析;藥物成分分析和核酸蛋白分子產(chǎn)物檢測等等?;诿毠茈娪炯夹g(shù)研發(fā)的儀器很多,在核酸和蛋白檢測方面,毛細管電泳技術(shù)也正在逐漸替代傳統(tǒng)平板凝膠電泳技術(shù)。
毛細管技術(shù)特點
毛細管電泳與傳統(tǒng)的平板凝膠電泳相比具有高分辨率、高速度、高自動化的優(yōu)勢。Qsep系列毛細管電泳儀獨特,就是基于毛細管電泳技術(shù),巧妙的將電泳膠和染料預(yù)先混合,制作成成品檢測耗材,結(jié)合激光誘導(dǎo)熒光檢測器,可快速方便的進行核酸蛋白樣本檢測??蓹z測的樣本非常廣泛,例如:Oligo引物的質(zhì)量控制、PCR產(chǎn)物檢測、總RNA和DNA完整性質(zhì)控、蛋白質(zhì)-DNA相互作用測定以及核酸適配體的篩選。
引物方面的應(yīng)用
就引物質(zhì)控來說,引物合成公司化學(xué)合成引物后通過HPLC儀器回收目的片段后進行凍干,后續(xù)還需要進行引物純度檢測。
因為引物的主帶和雜帶分子量時間可能僅相差1-2和堿基,所以實驗室一般采用PAGE方法進行純度質(zhì)控,整個質(zhì)檢過程比較繁瑣復(fù)雜,先配置加有7M尿素的16%的聚丙烯酰胺凝膠,取0.2-0.5OD的引物用尿素飽和液溶解后變性95℃ 2min進行600V電壓電泳,2-3h后,在紫外燈下檢測帶型,主帶附近無雜帶說明純度高,條帶不單一就要根據(jù)實際雜帶亮度來判斷是否需要重新合成。PAGE電泳的整個過程耗時較長,且無法對主帶和雜帶進行定量分析,更多靠經(jīng)驗判斷樣本合格與否。
有條件的單位可以采用毛細管電泳-質(zhì)譜聯(lián)用(CE-MS)技術(shù)來質(zhì)檢Oligo引物,不過質(zhì)譜儀價位較高,用于引物質(zhì)控會提高引物合成的成本,現(xiàn)有單位利用Qsep系列毛細管電泳儀進行Oligo純度質(zhì)控,分辨率靈敏度會顯著高于PAGE電泳,儀器價位合適,又可同質(zhì)譜儀一樣給出雜帶占比,量化的質(zhì)控數(shù)據(jù)更具準確性和直觀性(見圖1,圖2所示):